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  • 植物专业毕业实习报告

    时间:10-14 09:47:21来源:http://www.laixuea.com 实习总结报告阅读:8614

    概要:实 习 报 告 题 目:草莓的组织培养与相关培养基的制备 学 院: 植物保护学院 专业 班级: 动植物检疫专0402班 学 号: 20xx033020203 学生 姓名: 陈 英 化 指导 教师: 赵 岩 二〇〇 七 年 六 月 一 日 草莓的组织培养与相关培养基的制备 本次实习主要是学习草莓培养基的制备和草莓的组织培养法,为以后从事草莓方面的工作与研究打基础 1材料和方法: 1.1 供试植物材料: 草莓品种:(1)童子Ⅰ号:取自河北农业大学草莓试验田 (2)达塞莱克特:取自河北农业大学草莓试验田 1.2草莓组培苗的繁殖: 1.2.1 MS培养基的制备 (一)母液的配制:(参见附录一、二) (1)1mol·L-1 酸碱配制:称取4gNaOH,溶解后定容于100ml去离子水中,即配成1mol·L-1NaOH溶液;量取8.4ml浓盐酸(12 mol·L-1),加去离子水

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    实   习   报   告 

    题  目:草莓的组织培养与相关培养基的制备 

    学     院:    植物保护学院 

        专业 班级: 动植物检疫专0402班 

    学     号:  20xx033020203 

    学生 姓名:   陈   英   化 

    指导 教师:     赵    岩 

    二〇〇 七 年  六 月  一   日 

    草莓的组织培养与相关培养基的制备 

    本次实习主要是学习草莓培养基的制备和草莓的组织培养法,为以后从事草莓方面的工作与研究打基础 

    1 材料和方法: 

    1.1    供试植物材料: 

    草莓品种:(1)童子Ⅰ号: 取自河北农业大学草莓试验田 

                (2)达塞莱克特:取自河北农业大学草莓试验田 

    1.2 草莓组培苗的繁殖: 

    1.2.1  MS培养基的制备 

    (一)母液的配制:(参见附录一、二) 

    (1)1mol·L-1 酸碱配制:称取4gNaOH,溶解后定容于100ml去离子水中,即配成1mol·L-1NaOH溶液;量取8.4ml浓盐酸(12 mol·L-1),加去离子水定容至100ml,即配成1mol·L-1的盐酸溶液。 

    (2)大量元素母液配制(H4NO3、KNO3、KH2PO4、MgSO4·7H2O、CaCl2·2H2O)一定要分别称量,分别溶解,再定容。倒入贮液瓶中,贴好标签(日期、种类、倍数),放入冰箱内(2~4℃)或常温。 

    (3)微量元素母液配制(MnSO4·4H2O(MnSO4·H2O)、ZnSO4·7H2O、H3BO3 、KI、Na2MoO4·2H2O、CoCl2·6H2O、CuSO4·5H2O)分别称量,分别溶解(用蒸馏水或去离子水),定容。贴标签(日期、种类、倍数),放入冰箱内(2~4℃)或常温。 

    (4)铁盐母液配制(FeSO4·7H2O、Na2EDTA):5.57g硫酸亚铁和7.45g乙二胺四乙酸钠,分别用450ml去离子水(或蒸馏水)溶解,分别适当加热并不停搅拌,待分别溶解后,再将2种溶液混合在一起,调整PH值到5.5,最后加蒸馏水或去离子水定容于1000ml,倒入棕色瓶中,贴好标签放入冰箱保存。 

    (5)有机物母液配制:(肌醇、烟酸(VB3烟酸胺素(VB1)、烟酸吡多醇(VB6)、甘氨酸)称量,分别溶解,用蒸馏水或去离子水定容,放入细口瓶中备用,贴好标签放入冰箱保存。 

    (6)配制0.2mg·L-1BA(6-苄基氨基嘌呤):称20mg加少量1mol·L-1的盐酸溶解,然后用加热的蒸馏水定容100ml,配制1L培养基吸取量为1ml。 

    (7)配制0.5mg·L-1 IBA(吲哚丁酸):称50mg加少量95%乙醇溶解,然后用加热的蒸馏水定容100ml,配制1L培养基吸取量为1ml 。 

    (二)培养基的配制: 

    (1)称蔗糖(分化培养基用30g;生根培养基用20g)、琼脂5g用凉水调成糊状。 

    (2)取一定量的去离子水或自来水(一般是培养基量的80%~90%),加入不锈钢锅内,用电磁炉加热。母液依次按NH4NO3、KNO3、KH2PO4、MgSO4·7H2O、CaCl2·2H2O;MnSO4·4H2O(MnSO4·H2O)、ZnSO4·7H2O、H3BO3 、KI、Na2MoO4·2H2O、CoCl2·6H2O、CuSO4·5H2O;FeSO4·7H2O、Na2EDTA;肌醇、烟酸(VB3)、烟酸胺素(VB1)、烟酸吡多醇(VB6)、甘氨酸顺序吸取。 

    (3)水开后,加入蔗糖和琼脂,不断搅拌,开锅后停止加热。 

    (4)将量取好的母液倒入上述已加热的锅内,不断搅拌,使其均匀溶解。 

    (5)定容(考虑由温度引起的体积变化) 

    (6)调整培养基的PH值为5.8~6.0(用1mol·L-1NaOH溶液和1mol·L-1的盐酸溶液)。 

    (7)培养基的分装每40ml装入100ml三角瓶,用封口膜封瓶口,再用牛皮纸将瓶口包扎,对培养基及时做好标记。 

    (8)培养基的灭菌和保存:在压力表达0.105~0.120MPa时,灭菌20min,放置2~3d进行观察,若无污染迹象则可使用[3]。 

    (9)分化培养基:MS培养基,附加BA 0.5mg·L-1,蔗糖30g,琼脂5g;生根培养基1/2MS+IBA0.5mg·L-1+蔗糖20g+琼脂5g。 

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